生物SEM观察研究组织的表征,与TEM观察组织超薄切片相辅佐。
组织SEM取材方法与TEM类似,不同的是:要保护好组织的被观察表面、对这个面的识别和无损伤清洁。
具体操作中,应做到以下五点:
?首先必须定位准确,要使对照组和实验组保持取材位点和方向一致;
?确认并保护好被观察面的精细结构,做好标记;
?修整样品块,标准样品块尺寸约3~5mm3,太大了会影响固定、脱水、干燥及镀膜效果;修整样品块的操作应避免金属器材牵拉、按压等损伤;
?用缓冲液冲洗被观察表面污物2~3次,充分暴露表面精细结构;对肠粘膜上皮细胞、呼吸道上皮细胞等附着粘液应选择合适的物理或化学清洁方法(见微亚技术咨询);
?取材操作迅速,离体后尽快浸入醛类固定液,减少组织细胞自容。对于实验动物做灌注固定再取材更好。
完成取材之后,尽快送实验室进入制备程序。
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